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當前位置:首頁(yè)產(chǎn)品中心安諾倫自產(chǎn)磁珠質(zhì)粒提取試劑盒

磁珠質(zhì)粒提取試劑盒

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

采用優(yōu)化的 SDS-堿裂解法裂解細胞,高效去除抑制物等雜質(zhì),輕基磁珠能在高鹽、低 pH值狀態(tài)下與溶液中的核酸通過(guò)疏水作用、氫鍵作用和靜電作用等發(fā)生特異性結合,而不與其他雜質(zhì)(蛋白質(zhì))結合,迅速從樣品中分離質(zhì)粒 DNA。純化的質(zhì)粒 DNA 可直接用于酶切、PCR、測序、連接、轉化、轉染一些常規的傳代細胞等生物學(xué)實(shí)驗。

產(chǎn)品型號:
更新時(shí)間:2023-12-28
廠(chǎng)商性質(zhì):代理商
訪(fǎng)問(wèn)量:384

產(chǎn)品展示

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使用步驟

1、取 5-10 mL 過(guò)夜培養菌液加入離心管中,12000 rpm 離心 2 min 收集菌體沉淀,盡量吸棄上清。

2、向留有菌體沉淀的離心管中加入 250 uL Buffer PI (已加入 RNase A),使用移液槍或渦旋振蕩器充分混勻,懸浮菌體沉淀,確保無(wú)菌塊。37C靜置 15 min,以除去 RNA。

3、向離心管中加入 250 L Buffer P2,溫和上下顛倒混勻 4-6 次,充分混勻使菌體裂解,此時(shí)溶液應變得清亮粘稠。

注意:溫和地混勻,不要劇烈震蕩,以免打斷基因組 DNA。所用時(shí)間不應超過(guò) 5 min,以免質(zhì)粒受到破壞。

4、向離心管中加入 350 L Buffer P3,立即溫和上下顛倒混勻 8-10 次,充分混勻,此時(shí)應出現白色絮狀沉淀,12000 rpm 離心 10 min。注意:P3 加入后立即混合,避免產(chǎn)生局部沉淀。如果離心完仍有沉淀漂浮,可延長(cháng)離心時(shí)間取上清。

5、將步驟 4 中的上清液轉移到新的 2 mL 滅菌離心管中,加入等體積異丙醇,混勻,加入50 uL 輕基磁珠,顛倒混勻 1 min,室溫放置 2 min。

6、將步驟 5 中的離心管放在磁力架上靜置,磁珠吸附后,小心吸去液體。

7、將離心管從將離心管從磁力架上取下,加入 600 L Buffer Pw (請確認是否加入無(wú)水Z醇),混勻 2 min。

注意:加入漂洗液 PW 后,室溫靜置 2 min,有助于更好的去除雜質(zhì)。

8、將離心管放置于磁力架上靜置,磁珠吸附后,小心吸去液體。

9、將離心管從磁力架上取下,加入 600 uL Bufer PW,混勻2 min。

10、將離心管放置于磁力架上靜置,磁珠吸附后,棄廢液,吸盡管底管蓋的液體。

11、將離心管置于磁力架上,室溫晾干 15 min。注意:乙醇殘留會(huì )抑制后續的酶反應,所以晾于時(shí)要確保乙醇揮發(fā)干凈。但也不要干燥太長(cháng)時(shí)間,以免難以洗脫質(zhì)粒 DNA。

12、將離心管從磁力架上取下,加入 100-200 L 洗脫緩沖液 TB 或 ddHO (洗脫液可在水浴鍋中預熱),振蕩混勻,置于 56C水浴鍋中,孵育 10 min,期間每隔2 min 顛倒混勻。

13、將離心管放置于磁力架上,磁珠吸附后,小心將質(zhì)粒 DNA 溶液轉移至一個(gè)新離心管中,并于-20C保存。


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