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當前位置:首頁(yè)產(chǎn)品中心安諾倫自產(chǎn)DNA 凝膠回收試劑盒

DNA 凝膠回收試劑盒

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

DNA 凝膠回收試劑盒(DNA Gel Extraction Kit),是一種用于從 DNA瓊脂糖凝膠中回收目的 DNA 的試劑盒。本試劑盒采用優(yōu)化的緩沖體系和可高效、專(zhuān)一性吸附 DNA 的硅膠柱,從 TAE 或 TBE 瓊脂糖凝膠中回收 DNA 片段,通過(guò)離心力或者負壓讓含有核酸的溶液通過(guò)硅膠膜,使核酸在特定溶液環(huán)境中吸附在硅膠膜上,經(jīng)過(guò)洗滌、洗脫等步驟得到純的核酸。

產(chǎn)品型號:
更新時(shí)間:2023-12-28
廠(chǎng)商性質(zhì):代理商
訪(fǎng)問(wèn)量:437

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使用步驟

使用前請先在漂洗液 Buffer PW 中加入 12 mL 無(wú)水乙醇。1.將單一的目的 DNA 條帶從瓊脂糖凝膠中切下 (盡量切除多余部分)放入干凈的離心管中,稱(chēng)取凝膠重量(去除空管重量),100 mg凝膠等同于 100 L體積,作為一個(gè)凝膠體積注:若回收的 DNA 片用于克隆,須避免紫外照射損傷 DNA。盡量減少紫外暴露時(shí)間。

2.向膠塊中加入 1 倍體積 Buffer PE(如果凝膠重為 0.1g,則加入100 uL Buffer PE)。50-60C水浴溶膠5-10 min,期間溫和地上下翻轉離心管,以確保膠塊充分溶解。(若膠塊的體積過(guò)大,可事先將膠塊切成碎塊。)

3.將上一步所得溶液加入一個(gè)吸附柱中,室溫放置 1min,12,000rpm 離心 1min,棄廢液,將吸附柱放回收集管中。注:吸附的容量為750L,若上步得到的液大于 750L,可分批加入。

4.在吸附柱中加入 300 uL Buffer PE,12,000 rpm 離心 1 min,棄廢液,將吸附柱放回收集管中。

5.在吸附柱中加入 700 uL Bufer PW(確認已加入無(wú)水乙醇),12,000rpm 離心 1min,棄廢液,將吸附柱放回收集管中。

6.重復一次步驟 5。

7.吸附柱放回收集管后,12.000 rpm 離心 2 min,盡量除盡漂洗液注意:可將吸附柱置于室溫放置數分鐘,以防止殘留的乙醇影響后續的酶反應(酶切PCR等)實(shí)驗。

8.將吸附柱放入干凈的 1.5 mL 離心管中,開(kāi)蓋室溫靜置 5 min。向吸附膜中間位置加入 30 uL Buffer PB 或 ddHO (洗脫液應先放置于水浴鍋中預熱) ,室溫放置 2 min,12,000 rpm 離心2 min,收集DNA 溶液。

注意:洗脫體積不應小于30 l,體積過(guò)少影回收率。為了提高 DNA 的回收量,可將離心得到的溶液重新加回離心吸附柱中,12,000 rpm 離心 2 min,將DNA 液收集到離心管中?;厥沾笥? KB 片,建議 BuflerPB 預熱至55 C以提升回收效率。DNA 也可以用 ddH0 洗脫。DNA 產(chǎn)應保存在-20C以防DNA 降解。


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